洁净区的清洁和消毒以及无菌环境维持已经是各大生物制药企业非常重视的问题，根据2010版本的GMP无菌药品附录1中第九章的消毒要求，我们可以知道：

1. 企业应建立合适的物表清洁消毒操作规程，包含步骤如下：①根据被作用表面材质、污染物及微生物特性选择合适的清洁消毒剂与清洁用具；②根据实际生产周期制定清洁方法与周期；③根据清洁消毒方法进行清洁消毒验证；④根据清洁消毒验证结果确认清洁消毒程序的有效性与可行性；⑤制定清洁消毒操作规程并经审核批准；

2. 消毒剂的种类应多于一种，避免微生物产生耐药性；

3. 紫外线消毒不可代替化学消毒；

紫外线消毒主要通过紫外灭菌灯的照射及产生臭氧对房间、层流台、传递窗等物表进行消毒，但其消毒效果有限，对于被遮挡的区域、仪器死角等位置不能起到很好的消毒作用。故化学消毒与紫外消毒并用才能满足洁净区的清洁卫生要求；

4. 所用消毒剂和清洁剂的微生物污染状况应进行监测，并在规定的有效期内使用；

5. A级和B级洁净区应当使用无菌的或经无菌处理的清洁剂和消毒剂；

6. 必要时，可采用气体或汽相熏蒸的方法降低洁净区的卫生死角的微生物污染，并应对熏蒸剂、消毒剂的残留水平进行验证。

除了日常的维护之外，也应该在一定间隔期（比如一个季度一次），以及在大修、大停产等情况下，要进行较为彻底的灭菌。

那么对于比较彻底的环境灭菌，目前被广泛应用的化学消毒方法有三种：甲醛熏蒸、臭氧、VHP。针对这三种方式有哪些利弊，我们进行分析。

甲醛

甲醛消毒有两种：一是就地消毒，只对洁净室的局部空间进行小范围的消毒，可采用甲醛直接在室内蒸发（或加热蒸发），效果较差，且消毒后的排毒不便。另一种是与HVAC系统结合，甲醛从带有夹套的消毒罐内溢出进入空调机组的送风点总管然后送入洁净室内，为加大甲醛的蒸发强度，消毒罐夹套内通有蒸汽。

优点：对物表、空气中微生物达到log6的孢子杀灭效果，分布均匀性较好，材料兼容性较好，对彩钢板等腐蚀性很小。使用成本较低。

缺点：如果不具备相应配置的老厂房改造麻烦，另外残留物难以完全清除，吸附在材料中，会慢慢析出。灭菌过程很长，时间较长，甲醛是一类致癌物，2-7天较难检测出残留浓度和单位密度情况，所以放置时间较长。另外由于甲醛中多含有微量的甲酸，而对镀锌风管等有一定的腐蚀性，建议采用不锈钢管。

臭氧

臭氧消毒需要安装臭氧发生器。臭氧发生器有多种安装方式：台式、移动式或分体式，直接放置在需要消毒的洁净室内；管道式，可以安装在HVAC系统的送、回风总管内（该处风管需扩大）；此外，臭氧发生器还可以固定安装在净化空调机组中效过滤器的后端。后两种安装方式，内在对洁净室进行消毒的同时，对HVAC系统的风管、过滤器、内部设备等也起到了消毒作用。

臭氧消毒，其特点在于使用方便、安全，安装灵活，成本较低，对使用环境没有太大的要求。

但是在洁净室难以达到杀灭孢子作用，杀灭效果低于甲醛。材料兼容性较差。

VHP

VHP是指过氧化氢灭菌，需要过氧化氢发生器。目前市面上的过氧化氢发生器主要分为两大类：雾化和汽化。雾化一般采用低浓度的过氧化氢溶液，喷出的是过氧化氢液体小颗粒，汽化一般采用35%左右的高浓度过氧化氢溶液，喷出的是气体小颗粒。

两类VHP各有优缺点，但是总体来看，VHP灭菌都能对物表、空气中微生物达到log6的孢子杀灭效果，灭菌性很好，而且无残留，分解产物是水和氧气。灭菌周期较短，一般都在2-6小时左右，一个工作日可以完成洁净区的灭菌。不过VHP对灭菌环境有一定的要求，对环境中的相对湿度、温度都有一定的限制，高温和低温环境需要根据不同的情况来做判断。